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| 催產素(OT)酶聯免疫吸附測定試劑盒 |
酶聯免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定（ELISA）為免疫學中的經典實驗，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。
中文名
酶聯免疫吸附劑測定
外文名
enzyme linked immunosorbent assay
簡寫
ELISA或ELASA
類型
概念
| 分類方法 常用的ELISA可以分為以下五大類：①直接ELISA；②間接ELISA；③夾心ELISA；④競爭ELISA；⑤競爭抑制ELISA。其他的ELISA都隸屬于這五類ELISA或由這五類ELISA組合衍生。 |
定量測定
ELISA操作步驟復雜，影響反應因素較多，特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA，標準曲線的范圍一般較寬，曲線最高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數值，以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是理想的檢測區域。
1. 間接法測抗體
間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體(二抗)以檢測與固相抗原結合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
1)將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原，洗滌除去未結合的抗原及雜質。
2)加稀釋的樣本，保溫反應。樣本中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標抗抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗抗體結合，從而間接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關。
4)加底物顯色。
4.競爭法測抗原
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